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Identificação de espécies encontradas em laboratório de mosca

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Acabei de encontrar isso no meu Drosófila laboratório (dentro de um frasco fechado) - infelizmente estava morto, congelado por duas semanas. Alguém pode ajudar id o que é, e se representa um risco para minhas moscas (como os ácaros fazem)? Minha inclinação é que seja algum tipo de larva (mariposa?). Observe a incrível cauda de saca-rolhas ...

Encontrado em Uppsala, Suécia, em maio de 2014, em um frasco de Drosófila com comida (uma mistura de fermento, açúcar e ágar). O comprimento é de cerca de 3-4 mm excl. cauda.


Eu acho que é uma larva de um dos besouros do tapete (Dermestidae), alguns dos quais são sinantrópicos. Eles provavelmente estariam interessados ​​não em moscas vivas, mas em sua comida e cadáveres.

Sua aparência parece ser muito característica - alguém seria capaz de identificá-la a um nível genérico ou mesmo específico.


Laboratório 12: Isolamento e identificação de Enterobacteriaceae e Pseudomonas, parte 1

Os laboratórios 12 e 13 lidam com oportunistas e patogênicos bacilos Gram-negativos fermentativos que são membros da família bacteriana Enterobactereaceae, bem como bacilos Gram-negativos não fermentadores, como Pseudomonas e Acinetobacter.

UMA. ENTEROBACTERIACEAE: O FERMENTATIVO, GRAMA-NEGATIVO, BACILOS ENTÉRICOS

Bactérias pertencentes à família Enterobacteriaceae são os organismos mais comumente encontrados isolados de amostras clínicas. o Enterobacteriaceae é uma grande família diversa de bactérias pertencentes à ordem Enterobacteriales na aula Gammaproteobacter do filo Proteobacter. Membros medicamente importantes desta família são comumente referidos como bacilos entéricos fermentativos, Gram-negativos, porque eles são Bastonetes gram-negativos que pode fermentar açúcares. Muitos são da flora normal do trato intestinal de humanos e animais, enquanto outros infectam o trato intestinal. Os membros desta família têm as seguintes características em comum:

1. Eles são Bastonetes gram-negativos (ver Fig. 1)
2. Se móveis, eles possuem um arranjo peritrico de flagelos (ver Fig. 2)
3. Eles são Anaeróbios facultativos
4. Com poucas exceções, eles são oxidase negativo
5. Todas as espécies fermentar o açúcar glicose mas, por outro lado, variam amplamente em suas características bioquímicas
6. Mais reduzir nitratos a nitritos.

Para obter mais informações sobre a parede celular Gram-negativa, consulte o seguinte Objeto de Aprendizagem em seu Guia de Aula:

Pelo menos quarenta e quatro gêneros e mais de 130 espécies de Enterobacteriaceae foram reconhecidos. Alguns dos gêneros mais comuns clinicamente importantes da família Enterobacteriaceae incluir:

Salmonella Citrobacter Morganella
Shigella Enterobacter Yersinia
Proteus Serratia Edwardsiella
Escherichia Klebsiella Providencia

Vários gêneros de Enterobacteriaceae estão associados com gastroenterite e doenças transmitidas por alimentos. Esses incluem:

  • Salmonella,
  • Shigella,
  • certas cepas de Escherichia coli, e
  • certas espécies de Yersinia.

Todas as infecções do trato intestinal são transmitido pela via fecal-oral.

Existem duas espécies de Salmonella, Salmonella enterica e Salmonella bongori. Qualquer infecção causada por Salmonella é chamado de salmonelose. Não tifóide Salmonella representa uma estimativa de 520 casos por 100.000 habitantes (aproximadamente 1.600.000 casos) por ano nos EUA e pelo menos 500 morrem. Uma vez que muitos animais diferentes carregam Salmonella no trato intestinal, as pessoas geralmente são infectadas pela ingestão de aves, ovos, carnes, laticínios, vegetais ou frutas mal refrigerados, crus ou mal cozidos contaminado com fezes de animais.

A eterite é a forma mais comum de salmonelose. Os sintomas geralmente aparecem de 6 a 48 horas após a ingestão da bactéria e incluem vômitos, náuseas, diarreia não sanguinolenta, febre, cólicas abdominais, mialgias e dor de cabeça. Os sintomas geralmente duram de 2 dias a 1 semana, seguidos de recuperação espontânea. Todas as espécies de Salmonella pode causar bacteremia mas S. enterica o serótipo Typhi, isolado apenas em humanos, freqüentemente se espalha para o sangue causando uma forma grave de salmonelose chamada febre tifóide. Cerca de 400 casos de febre tifóide ocorrem a cada ano nos EUA, mas aproximadamente 75% deles são adquiridos durante viagens internacionais.

Salmonella a sorotipagem é um método de subtipagem de identificação baseado na identificação de antígenos distintos da parede celular, flagelar e capsular com anti-soro conhecido, como será discutido no Laboratório 17. Salmonella os serotipos Enteritidis e Typhimurium são os dois serotipos mais comuns nos Estados Unidos, sendo responsáveis ​​por aproximadamente 35 a 40% de todas as infecções confirmadas por cultura de laboratório. Como acima mencionado, S. enterica O serótipo Typhi é responsável pela febre tifóide.

Algum Shigella infecção é chamada de shigelose. diferente Salmonella, que pode infectar muitos animais diferentes, Shigella infecta apenas humanos e outros primatas superiores. Existem aproximadamente 14.000 casos laboratoriais de shigelose por ano relatados nos Estados Unidos, com um total estimado de 450.000 casos e 70 mortes.

Shigelose freqüentemente começa com diarreia aquosa, febre e cólicas abdominais mas pode evoluir para disenteria com escassez de fezes contendo sangue, pus e muco. O período de incubação é de 1-3 dias. A diarreia aquosa profusa inicial geralmente aparece primeiro como resultado da enterotoxina. Em 1-2 dias, isso evolui para cólicas abdominais, com ou sem sangue nas fezes. A shigelose clássica se apresenta como cólicas abdominais inferiores e fezes abundantes de sangue e pus se desenvolvem à medida que o Shigella invadir a mucosa do cólon.

Escherichia coli é uma das flora normal dominante no trato intestinal de humanos e animais. Algumas cepas, no entanto, pode causar infecções nos intestinos enquanto outros são capazes de causar infecções fora dos intestinos. Patogênico extraintestinal E. coli causam infecções oportunistas como infecções do trato urinário, infecções de feridas e septicemia e serão discutidas em maiores detalhes abaixo. Intestinal ou diarreiogênico E. coli causar infecções do trato intestinal. Diarreiogênico E. coli incluir:

  • Enterotoxigenc E. coli (ETEC) produzem enterotoxinas que causam a perda de íons de sódio e água do intestino delgado, resultando em diarreia aquosa. É uma causa importante de diarreia em países pobres. Mais da metade da diarreia de todos os viajantes é causada por ETEC, quase 80.000 casos por ano nos EUA.
  • Enteropatogênico E. coli (EPEC) causa diarreia endêmica em países pobres, especialmente em crianças menores de 6 meses de idade. A bactéria interrompe as microvilosidades normais nas células epiteliais do intestino delgado, resultando em má absorção e diarreia. Eles não produzem enterotoxina ou toxina shiga e não são invasivos. É raro em países industrializados.
  • Enteroagregativo E. coli (EAEC) é uma causa de diarreia endêmica em crianças em países empobrecidos e países industrializados. Também é responsável por uma diarreia persistente em pessoas infectadas com HIV. Provavelmente causa diarreia ao aderir às células epiteliais da mucosa do intestino delgado e interferir em sua função.
  • Enteroinvasivo E. coli (EIEC) invadir e matar células epiteliais do cólon, geralmente causando diarreia aquosa, mas às vezes progredindo para uma síndrome do tipo disenteria com sangue nas fezes. Ocorre principalmente em países empobrecidos e é raro em países industrializados.
  • Enterohemorrágico E. coli (EHEC), como E. coli 0157: H7, produzem uma toxina shiga que mata as células epiteliais do cólon causando colite hemorrágica, uma diarreia com sangue. Em casos raros, a toxina shiga entra no sangue e é transportada para os rins onde, geralmente em crianças, danifica as células vasculares e causa a síndrome hemolítico-urêmica. E. coli 0157: Acredita-se que H7 cause mais de 20.000 infecções e até 250 mortes por ano nos EUA.

Várias espécies de Yersinia, como Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis também são causas de doença diarreica.

Muitos outros gêneros da família Enterobacteriaceae estão microbiota normal do trato intestinal e são considerados patógenos oportunistas. o gêneros mais comuns de Enterobacteriaceae causando infecções oportunistas em humanos são:

  • Escherichia coli,
  • Proteus,
  • Enterobacter,
  • Klebsiella,
  • Citrobacter, e
  • Serratia.

Eles agem como patógenos oportunistas quando eles são introduzidos em locais do corpo onde normalmente não são encontrados, especialmente se o hospedeiro estiver debilitado ou imunossuprimido. Todos eles causam os mesmos tipos de infecções oportunistas, a saber:

  • infecções do trato urinário,
  • infecções de feridas,
  • pneumonia, e
  • septicemia.

Esses bacilos Gram-negativos da flora normal, junto com bactérias Gram-positivas, como Enterococcus espécies (ver Laboratório 14) e Estafilococo espécies (ver Laboratório 15), estão entre as causas mais comuns de infecções associadas à saúde (anteriormente chamado infecções nosocomiais).

De acordo com o site do Centro de Controle e Prevenção de Doenças (CDC) de infecções associadas aos cuidados de saúde, & quotSó nos hospitais americanos, infecções associadas à saúde são responsáveis ​​por cerca de 1,7 milhão de infecções e 99.000 mortes associadas a cada ano. Dessas infecções:

  • 32 por cento de todas as infecções associadas aos cuidados de saúde são infecções do trato urinário (ITUs)
  • 22 por cento são infecções de sítio cirúrgico
  • 15 por cento são pneumonia (infecções pulmonares)
  • 14 por cento são infecções da corrente sanguínea & quot

A maioria dos pacientes com infecções associadas aos cuidados de saúde está predisposta à infecção por causa de medidas de suporte invasivas, como cateteres urinários, linhas intravasculares e intubação endotraqueal.

De longe, a bactéria Gram-negativa mais comum que causa infecções nosocomiais é Escherichia coli. E. coli causa entre 70 e 90% das infecções do trato urinário superior e inferior (ITUs). Também é uma causa frequente de infecções de feridas abdominais e septicemia. Dependendo da instalação, E. coli é responsável por 12% a 50% de todas as infecções associadas aos cuidados de saúde.

No entanto, de acordo com um estudo de 2008, Enterobacteriaceae outro que não seja E. coli foram responsáveis ​​por 7 dos 10 organismos Gram-negativos mais comuns isolados do trato urinário, trato respiratório e infecções da corrente sanguínea de pacientes de unidade de terapia intensiva entre 2002 e 2008 nos Estados Unidos. Esses incluem Klebsiella pneumoniae (15%), Enterobacter cloacae (9%), Serratia marcescens (6%), Enterobacter aerogenes (4%), Proteus mirabilis (4%), Klebsiella oxytoca (3%), e Citrobacter freundii (2%). Além disso, a National Healthcare Safety Network relatou K. pneumoniae (6%) , Enterobacter spp. (5%), e K. oxytoca (2%) entre as 10 infecções associadas aos cuidados de saúde mais frequentemente isoladas entre os anos entre 2006 e 2007.

1. Infecções do trato urinário

A infecção mais comum causada por oportunistas Enterobacteriaceae é um infecção do trato urinário (ITU). UTIs são responsáveis ​​por mais de 8.000.000 de consultas médicas por ano nos EUA e até 100.000 hospitalizações. Entre a população não hospitalizada e não debilitada, as ITUs são mais comuns em mulheres por causa de sua uretra mais curta e da maior proximidade entre seu ânus e a abertura uretral. (Mais de 20 por cento das mulheres têm infecções do trato urinário recorrentes.) No entanto, qualquer pessoa pode se tornar suscetível a infecções urinárias na presença de fatores predisponentes que causam anormalidades funcionais e estruturais do trato urinário. Essas anormalidades aumentam o volume de urina residual e interferem na eliminação normal das bactérias ao urinar. Esses fatores incluem aumento da próstata, útero flácido, expansão do útero durante a gravidez, paraplegia, espinha bífida, formação de tecido cicatricial e cateterismo. Entre 35 e 40 por cento de todas as infecções nosocomiais, cerca de 900.000 por ano nos EUA, são ITUs e geralmente estão associadas ao cateterismo.

E. coli e Staphylococcus saprophyticus (um estafilococo Gram-positivo que será discutido no Laboratório 15) causa cerca de 90 por cento de todas as ITUs não complicadas. A maioria das ITUs não complicadas restantes é causada por outros entéricos Gram-negativos, como Proteus mirabilis e Klebsiella pneumoniae ou pela Enterococcus faecalis (um estreptococo Gram-positivo que será discutido no Laboratório 14). E. coli é responsável por mais de 50 por cento das ITUs associadas à saúde. Outras causas de ITUs adquiridas em hospitais incluem outras espécies de Enterobacteriaceae (tal como Proteus, Enterobacter, e Klebsiella), Pseudomonas aeruginosa (discutido abaixo), Enterococcus espécies (discutidas no laboratório 14), Staphylococcus saprophyticus (discutido no Laboratório 15), e o fermento Candida (discutido no laboratório 9).

O padrão tradicional de cultura de laboratório para uma UTI tem sido a presença de mais de 100.000 UFC (unidades formadoras de colônia, consulte o Laboratório 4) por mililitro (ml) de urina de jato médio, ou qualquer UFC de uma amostra de urina obtida por cateter. Mais recentemente, isso foi modificado e contagens de apenas 1000 colônias de um único tipo por ml ou de apenas 100 coliformes por ml são agora consideradas como indicadoras de ITU.

2. Infecções de feridas

Infecções de feridas são devido à contaminação fecal de feridas externas ou resultado de feridas que causam trauma para o trato intestinal, como feridas cirúrgicas, feridas de arma de fogo e feridas de faca. Neste último caso, as bactérias fecais saem do trato intestinal e entram na cavidade peritoneal causando peritonite e formação de abcessos nos órgãos encontrados na cavidade peritoneal.

3. Pneumonia

Embora às vezes causem pneumonia, a Enterobacteriaceae representam menos de 5% das pneumonias bacterianas que requerem hospitalização.

4. Infecções da corrente sanguínea

Septicemia Gram-negativa é o resultado da passagem dessas bactérias Gram-negativas oportunistas para o sangue. Eles são geralmente introduzido no sangue a partir de algum outro local de infecção, como um rim, ferida ou pulmão infectado. Olhando para pacientes que desenvolvem choque séptico:

  • As infecções do trato respiratório inferior são a fonte em cerca de 25% dos pacientes.
  • As infecções do trato urinário são a fonte em cerca de 25% dos pacientes.
  • As infecções dos tecidos moles são a fonte em cerca de 15% dos pacientes.
  • As infecções gastrointestinais são a fonte em cerca de 15% dos pacientes.
  • As infecções do trato reprodutivo são a fonte em cerca de 10% dos pacientes.
  • Corpos estranhos (linhas intravasculares, dispositivos cirúrgicos implantados, etc.) são a fonte em cerca de 5% dos pacientes.

Existem aproximadamente 750.000 casos de septicemia por ano nos EUA e 200.000 casos de choque séptico. O choque séptico resulta em aproximadamente 100.000 mortes por ano nos EUA. Aproximadamente 45 por cento dos casos de septicemia são devidos a bactérias Gram-negativas. Klebsiella, Proteus, Enterobacter, Serratia, e E. coli, são todos comuns Enterobacteriaceae causando septicemia. (Outros 45 por cento são resultado de bactérias Gram-positivas (ver Labs 14 e 15) e 10 por cento são devidos a fungos, principalmente a levedura Candida (consulte o Laboratório 9).

Na membrana externa da parede celular Gram-negativa, a porção do lipídio A do lipopolissacarídeo (LPS) funciona como um endotoxina (veja a Fig. 4). A endotoxina prejudica indiretamente o corpo quando grandes quantidades são liberadas durante infecções Gram-negativas graves. Isso, por sua vez, causa uma resposta excessiva de citocinas.

1. O LPS liberado da membrana externa da parede celular Gram-negativa primeiro se liga a uma proteína de ligação ao LPS que circula no sangue e este complexo, por sua vez, se liga a uma molécula receptora (CD 14) encontrada na superfície de defesa do corpo células chamadas macrófagos (ver Fig. 5) localizadas na maioria dos tecidos e órgãos do corpo.

2. Acredita-se que isso promova a capacidade do receptor toll-like TLR-4 de responder ao LPS, desencadeando os macrófagos a liberar vários produtos químicos reguladores de defesa chamados citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-alfa (TNF-alfa), interleucina- 1 (IL-1), interleucina-6 (IL-6) e interleucina-8 (IL-8) e fator de ativação plaquetária (PAF). As citocinas então se ligam aos receptores de citocinas nas células-alvo e iniciam a inflamação e ativam as vias do complemento e a via de coagulação (ver Fig. 5).

3. O complexo do LPS e da proteína de ligação ao LPS também pode se ligar a moléculas chamadas CD14 nas superfícies dos glóbulos brancos fagocíticos chamados neutrófilos, fazendo com que eles liberem proteases e radicais de oxigênio tóxicos para a morte extracelular. As quimiocinas, como a interleucina-8 (IL-8), também estimulam a morte extracelular. Além disso, o LPS e as citocinas estimulam a síntese de um vasodilatador denominado óxido nítrico.

D urante infecções locais menores com poucas bactérias presentes, baixos níveis de LPS são liberados levando à produção moderada de citocinas pelos monócitos e macrófagos e, em geral, promovendo a defesa do corpo ao estimular a inflamação e febre moderada, quebrando as reservas de energia para fornecer energia para a defesa, ativar a via do complemento e a via da coagulação e, geralmente, estimular as respostas imunes (ver Fig. 5). Também como resultado dessas citocinas, glóbulos brancos fagocíticos circulantes, como neutrófilos e monócitos, aderem às paredes dos capilares, espremem-se e penetram no tecido, um processo denominado diapedese. Os glóbulos brancos fagocíticos, como os neutrófilos, matam os micróbios invasores com suas proteases e radicais de oxigênio tóxicos.

No entanto, durante infecções sistêmicas graves com grande número de bactérias presentes, altos níveis de LPS são liberados, resultando na produção excessiva de citocinas pelos monócitos e macrófagos e isso pode causar danos ao corpo (ver Fig. 6). Além disso, os neutrófilos começam a liberar suas proteases e radicais de oxigênio tóxicos que matam não apenas as bactérias, mas também o tecido circundante. Os efeitos prejudiciais incluem febre alta, hipotensão, destruição de tecido, definhamento, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), coagulação intravascular disseminada (DIC) e dano ao endotélio vascular, resultando em choque, falência de múltiplos sistemas de órgãos (MOSF) e, frequentemente, morte.

Essa resposta inflamatória excessiva é conhecida como Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica ou SIRS. A morte é o resultado do que é chamado de cascata de choque. A sequência de eventos é a seguinte:

  • Danos aos capilares induzidos por neutrófilos, bem como vasodilatação prolongada, resultam em sangue e plasma deixando a corrente sanguínea e entrando no tecido circundante. Isso pode levar a uma diminuição do volume de sangue circulante (hipovolemia).
  • A vasodilatação prolongada também leva à diminuição da resistência vascular dentro dos vasos sanguíneos, enquanto altos níveis de TNF inibem o tônus ​​do músculo liso vascular e a contratilidade miocárdica. Isso resulta em hipotensão acentuada.
  • A ativação da via de coagulação do sangue pode causar a formação de coágulos chamados microtrombos nos vasos sanguíneos de todo o corpo, causando coagulação intravascular disseminada (DIC).
  • O aumento da permeabilidade capilar como resultado da vasodilatação nos pulmões, bem como lesão induzida por neutrófilos nos capilares nos alvéolos, leva à inflamação aguda, edema pulmonar e perda de trocas gasosas nos pulmões (síndrome da angústia respiratória aguda ou SDRA). Como resultado, o sangue não é oxigenado.
  • Hipotensão, hipovolemia, SDRA e DIC resultam em hipoperfusão acentuada.
  • A hipoperfusão no fígado pode resultar em uma queda no nível de glicose no sangue por disfunção hepática.
  • A hipoperfusão leva à acidose e ao pH errado para as enzimas envolvidas no metabolismo celular, resultando em morte celular.
  • A hipoperfusão também pode levar à insuficiência cardíaca.

Coletivamente, isso pode resultar em :

  • isquemia de órgão-alvo: uma restrição no suprimento de sangue que resulta em danos ou disfunção de tecidos ou órgãos,
  • falência de múltiplos órgãos do sistema (MSOF),
  • morte.

Ambos os pili e proteínas de superfície na parede celular Gram-negativa funcionam como adesinas, permitindo que a bactéria aderir intimamente às células hospedeiras e outras superfícies para colonizar e resistir ao enxágue. Algumas bactérias Gram-negativas também produzem invasinas, permitindo que algumas bactérias invadir células hospedeiras. Motilidade, cápsulas, formação de biofilme e exotoxinas também desempenham um papel na virulência de alguns Enterobacteriaceae.

Para obter mais informações sobre os fatores de virulência associados a vários Enterobacteriaceae, consulte os seguintes Objetos de Aprendizagem em seu Guia de Aula:

Muitos dos Enterobacteriaceae também possui Plasmídeos R (resistência). Esses plasmídeos são pequenos pedaços de DNA circular não cromossômico que podem codificar para resistência múltipla a antibióticos Além disso, o plasmídeo pode codificar para um sexo pilus, permitindo que a bactéria passe plasmídeos R para outras bactérias por conjugação. Entre 50 e 60 por cento das bactérias que causam infecções associadas aos cuidados de saúde são resistentes aos antibióticos.

Para obter mais informações sobre a resistência bacteriana aos antibióticos, consulte o seguinte Objeto de Aprendizagem em seu Texto da Aula:

A identificação de bastonetes Gram-negativos que fermentam a lactose pertencentes à família das bactérias Enterobacteriaceae (bactéria comumente referida como coliformes) na água é freqüentemente usado para determinar se a água foi contaminada por fezes e, portanto, pode conter patógenos causadores de doenças transmitidos pela via fecal-oral. O procedimento para isso é fornecido no Apêndice E.

B. PSEUDOMONAS E OUTROS BACILOS GRAMA-NEGATIVOS NÃO FERMENTATIVOS

Os bacilos Gram-negativos não fermentativos referem-se a bastonetes Gram-negativos ou cocobacilos que não pode fermentar açúcares. Os bacilos Gram-negativos não fermentativos costumam ser habitantes normais do solo e da água. Eles podem causar infecções humanas quando colonizam indivíduos imunossuprimidos ou obtêm acesso ao corpo por meio de traumas. No entanto, menos de um quinto dos bacilos Gram-negativos isolados de amostras clínicas são bacilos não fermentativos. De longe, o mais comum Bastão Gram-negativo não fermentativo que causa infecções humanas é Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas pertence à família Pseudomonadaceae na ordem Pseudomonadales na aula Gammaproteobacter do filo Proteobacter.

Pseudomonas aeruginosa também é um patógeno oportunista. É uma causa comum de infecções nosocomiais e pode ser encontrada crescendo em uma grande variedade de locais ambientais. No ambiente hospitalar, por exemplo, tem sido isolado de ralos, pias, torneiras, água de flores cortadas, soluções de limpeza, remédios e até sabonetes desinfetantes. É especialmente perigoso para o paciente debilitado ou imunocomprometido.

Como o oportunista Enterobacteriaceae, Pseudomonas é um bastão Gram-negativo, é freqüentemente encontrado em pequenas quantidades nas fezes e causa similar infecções oportunistas: infecções do trato urinário, infecções de feridas, pneumonia e septicemia. P aeruginosa é o quarto patógeno nosocomial mais comumente isolado, respondendo por 10% de todas as infecções adquiridas em hospitais. P. aeruginosa é responsável por 12% das infecções do trato urinário adquiridas em hospitais, 16% dos casos de pneumonia nosocomial e 10% dos casos de septicemia. Além disso, P. aeruginosa é uma causa significativa de infecções por queimaduras com uma taxa de mortalidade de 60 por cento. Também coloniza e infecta cronicamente os pulmões de pessoas com fibrose cística. Como outros bacilos Gram-negativos oportunistas, Pseudomonas aeruginosa também libera endotoxina e freqüentemente possui R-plasmídeos. Uma série de outras espécies de Pseudomonas também foram encontrados para causar infecções humanas.

Para obter mais informações sobre os fatores de virulência associados a Pseudomonas, consulte os seguintes Objetos de Aprendizagem em seu Guia de Aula:

Outros bacilos Gram-negativos não fermentativos que às vezes são patógenos oportunistas em humanos incluem Acinetobacter, Aeromonas, Alcaligenes, Eikenella, Flavobacterium, e Moraxella.

Acinetobacter tornou-se uma causa frequente de infecções de feridas nosocomiais, pneumonia, e septicemia. A bactéria se tornou bem conhecida como causa de infecções entre os veteranos das guerras no Iraque e no Afeganistão e está se tornando uma causa crescente de infecções nosocomiais nos EUA. Acinetobacter Acredita-se que tenha sido contratado em hospitais de campanha no Iraque e Afeganistão e posteriormente transportado para hospitais de veteranos nos EUA. Como a maioria das espécies são resistentes a múltiplos antibióticos, muitas vezes é difícil de tratar. Acinetobacter é comumente encontrada no solo e na água, bem como na pele de pessoas saudáveis, especialmente profissionais de saúde. Embora existam inúmeras espécies de Acinetobacter que pode causar doenças humanas, Acinetobacter baumannii é responsável por cerca de 80% das infecções relatadas.

Artigos do Medscape sobre infecções associadas a organismos mencionados neste exercício de laboratório. O registro para acessar este site é gratuito.

  • Salmonelose
  • Febre tifóide
  • Shigelose
  • Escherichia coli
  • Proteusespécies
  • Klebsiellaespécies
  • Enterobacterespécies
  • Serratiaespécies
  • Yersinia enterocolitica
  • Yersinia pseudotuberculosis
  • Acinetobacter baumannii
  • Pseudomonas aeruginosa
  • Infecções do trato urinário
  • Infecções de feridas
  • Pneumonia adquirida na comunidade
  • Sepse

CENERIOS PARA O LABORATÓRIO DE HOJE

Os alunos serão atribuídos estudo de caso 1A ou 1B Para fazer hoje. Todos os alunos farão o Estudo de Caso 2 como parte dos resultados da próxima vez.

Estudo de caso # 1A

Uma mulher de 66 anos com história de infecções recorrentes do trato urinário e múltiplas terapias com antibióticos apresenta frequência e urgência de urinar, disúria, desconforto suprapúbico, dor lombar e uma temperatura de 99,2 ° C. Um hemograma completo (CBC) mostra leucocitose com desvio à esquerda. Uma tira reagente de urina mostra um teste de esterase de leucócitos positivo, um teste de nitrito positivo, 30 mg de proteína por decilitro e glóbulos vermelhos na urina.

Suponha que o seu desconhecido seja uma cultura de urina dessa pessoa.

Estudo de caso # 1B

Uma mulher de 72 anos, diabética e tabagista, deu entrada no hospital com uma ferida na perna que não está cicatrizando. Ela parece confusa e ansiosa, tem uma temperatura de 102 ° C, uma frequência cardíaca de 101 batimentos por minuto, uma frequência respiratória de 29 respirações por minuto, uma pressão arterial de 94/32 mm Hg, uma produção de urina de apenas 110 cc para o últimas 8 horas, e uma contagem total de leucócitos de 2300 / & microL. É feita uma cultura de sangue.

Suponha que o seu desconhecido seja uma hemocultura dessa pessoa.

CUIDADO: TRATAR CADA DESCONHECIDO COMO UM PATOGÊNIO !. Informe o seu instrutor sobre quaisquer derramamentos ou acidentes. LAVE E SANITIZA AS SUAS MÃOS BEM antes de sair do laboratório.

Taxo N & reg disk, álcool, frasco conta-gotas de água destilada, cotonete e qualquer um prato de ágar MacConkey ou uma placa de ágar Cetrimida e um EnteroPluri-Teste

PROCEDIMENTO (para ser feito em grupos de 3)

[Tenha em mente que outros organismos além do Enterobacteriaceae e Pseudomonas podem causar essas infecções, portanto, em uma situação clínica real, outros testes de laboratório e culturas para bactérias diferentes daquelas nas quais este laboratório se baseia também devem ser realizados.]

1 Execute um Coloração de Gram em seu desconhecido. Lembre-se de que a concentração de bactérias em lâminas preparadas retirando bactérias de uma placa de Petri tende a ser muito maior do que aquelas preparadas retirando bactérias de uma cultura de caldo, então tenha cuidado para não descolorir. Continue descolorindo até que o roxo pare de sair do esfregaço bacteriano e, em seguida, lave com água.

Registre os resultados de sua coloração de Gram na seção de coloração de Gram do Laboratório 13.

2. Se você tem um bacilo Gram-negativo, determine se é um fermentativo Bacilo Gram-negativo como a maioria Enterobacteriaceae ou um não fermentativo Bacilo Gram-negativo, como Pseudomonas realizando um teste de oxidase do seguinte modo:

uma. Usando uma pinça inflamada com álcool, remova um disco de Taxo-N & reg e umedeça-o com uma gota de água destilada estéril.

b. Coloque o disco umedecido nas colônias da cultura de seu desconhecido.

c. Usando um cotonete esterilizado, raspe algumas das colônias e espalhe-as no disco de Taxo-N & reg.

No teste imediato, as reações positivas para oxidase irão se tornar um cor rosa em 30 segundos (veja a Fig. 10). Negativo para oxidase não ficará rosa (ver Fig. 9). Essa reação dura apenas alguns minutos. No teste atrasado, colônias oxidase-positivas dentro de 10 mm do disco Taxo-N & reg irão ficará preto em 20 minutos e permanecerá preto (ver Fig 11). Se a bactéria for negativa para oxidase, o crescimento ao redor do disco não ficará preto (ver Fig. 12).

Registre os resultados do teste de oxidase na seção de teste de oxidase do Laboratório 13.

3. Se o seu desconhecido for negativo para oxidase, indicando um bacilo Gram-negativo fermentativo, faça as seguintes inoculações:

uma. Streak seu desconhecido para o isolamento em um prato de Ágar MacConkey, uma meio seletivo usado para o isolamento de bastonetes Gram-negativos não fastidiosos e particularmente membros do família Enterobacteriaceae, usando um dos dois padrões de listras ilustrados na Fig. 4 e Fig. 5. Incube de cabeça para baixo e empilhado no suporte da placa de Petri na prateleira da incubadora 37 & degC correspondente à sua seção de laboratório.

b. Inocular um EnteroPluri-Teste do seguinte modo:

1. Remova ambas as tampas do EnteroPluri-Teste e com o extremidade reta do fio de inoculação, escolha o equivalente a uma colônia de sua placa desconhecida. Um inóculo visível deve ser visto na ponta e na lateral do fio.

2. Inocular o EnteroPluri-Teste agarrando o extremidade dobrada do fio de inoculação, torcendo-o e retirando o fio através de todos os 12 compartimentos usando um movimento giratório.

3. Reinsira o fio no tubo (use um movimento giratório) através de todos os 12 compartimentos até que o entalhe no fio esteja alinhado com a abertura do tubo. (A ponta do fio deve ser vista no compartimento de citrato.) Quebre o fio no entalhe dobrando. Não descarte o fio ainda.

4. Usando a parte quebrada do fio, Faça furos no celofane que cobre as entradas de ar localizadas no lado arredondado dos últimos 8 compartimentos. Seu instrutor mostrará a localização correta. Descarte o fio quebrado no recipiente do desinfetante.

5. Substitua ambas as tampas e incubar o EnteroPluri-Teste em sua superfície plana em 36& deg- 37& degC por 18-24 horas.

4. Se o seu desconhecido for oxidase-positivo, indicando um bacilo Gram-negativo não fermentativo, faça a seguinte inoculação:

uma. Streak seu desconhecido para o isolamento em um prato de Ágar cetrimida, um meio seletivo e diferencial para Pseudomonas, usando um dos dois padrões de listras ilustrados na Fig. 4 e Fig. 5. Incube de cabeça para baixo e empilhado no suporte da placa de Petri na prateleira da incubadora 37 & degC correspondente à sua seção de laboratório.

Observe que Ágar MacConkey também pode ser usado para isolar Pseudomonas mas estamos usando o ágar Cetrimida hoje porque nos permite detectar a produção do pigmento solúvel em água azul a verde por Pseudomonas aeruginosa, bem como a produção de fluoresceína.

Você também irá inocular um EnteroPluri-Teste apenas para a prática, mas tenha em mente que o EnteroPluri-Teste é usado para identificar Enterobacteriaceae, não Pseudomonas.

Estudo de caso # 2

Depois de receber um filhote de frango na Páscoa, um menino de 7 anos é levado ao pronto-socorro com sintomas de vômitos, náuseas, diarreia não sanguinolenta, cólicas abdominais e temperatura de 40 graus Celsius. Um hemograma completo (CBC) mostra que a contagem de leucócitos está dentro do intervalo de referência.

Esta placa de ágar XLD e este EnteroPluri-Teste são de uma cultura de fezes deste paciente.

CUIDADO: TRATAR O DESCONHECIDO COMO UM PATÓGENO !. Informe o seu instrutor sobre quaisquer derramamentos ou acidentes. LAVE E SANITIZA BEM AS SUAS MÃOS antes de sair do laboratório.

Placa de ágar XLD de demonstração e EnteroPluri-Teste

PROCEDIMENTO (para ser feito em grupos de 3)

1. Observe as seguintes demonstrações mostrado nos links diretamente abaixo e identificar a bactéria causadora:

uma. Uma placa de ágar XLD,um meio seletivo usado para isolar e diferenciar bactérias entéricas Gram-negativas, especialmente patógenos intestinais, como Salmonella e Shigella.

2. Registre seus resultados na seção Resultados do Laboratório 13.

C. Testes de laboratório usados ​​como parte do laboratório atual

Isolar Enterobacteriaceae e Pseudomonas, as amostras do local infectado são semeadas em qualquer um de um grande número de mídia seletiva e diferencial tais como ágar EMB, ágar Endo, ágar Deoxicolato, ágar MacConkey, ágar Hektoen Enteric e ágar XLD. Veremos três deles.

1. MacConkey Agar

Ágar MacConkey é um meio seletivo usado para o isolamento de bastonetes Gram-negativos não fastidiosos, particularmente membros da família Enterobacteriaceae e o gênero Pseudomonas, e a diferenciação da fermentação da lactose de bacilos Gram-negativos não fermentadores da lactose. Ágar MacConkey contém o corante violeta cristal, bem como sais biliares que inibem o crescimento da maioria das bactérias Gram-positivas mas não afetam o crescimento da maioria dos Gram-negativos (ver Fig. 6).

Se a bactéria Gram-negativa fermenta a lactose do açúcar no meio, os produtos finais ácidos reduzem o pH do meio. O vermelho neutro no ágar torna-se vermelho quando o pH cai abaixo de 6,8. Conforme o pH cai, o vermelho neutro é absorvido pela bactéria, causando o as colônias aparecem de rosa brilhante a vermelho.

  • Fementação forte de lactose com altos níveis de produção de ácido pela bactéria causa o colônias e crescimento confluente para aparecer de rosa brilhante a vermelho. O ácido resultante, em concentrações altas o suficiente, também pode fazer com que os sais biliares no meio precipitem da solução fazendo com que um precipitado rosa (turvação) apareça no ágar em torno do crescimento(veja a Fig. 13).
  • Fermentação fraca de lactose pela bactéria causa o colônias e crescimento confluente para aparecer de rosa a vermelho, mas sem a precipitação de sais biliares há sem halo rosa ao redor do crescimento(veja a Fig. 15).
  • Se a bactéria não fermentar lactose, a colônias e crescimento confluente aparecem incolores e a ágar ao redor da bactéria permanece relativamente transparente(veja a Fig. 17).

Morfologia típica da colônia de nossas cepas de Enterobacteriaceae e Pseudomonas aeruginosa no ágar MacConkey é o seguinte:

1. Escherichia coli: colônias e crescimento confluente aparecem de rosa brilhante a vermelho e rodeados por um precipitado rosa (nebulosidade) no ágar ao redor do crescimento (ver Fig. 13). Fermentação forte de lactose.

2. Klebsiella pneumoniae: colônias e crescimento confluente aparecem de rosa brilhante a vermelho, mas não são circundados por um precipitado rosa (turvação) no ágar ao redor do crescimento (ver Fig. 14). Fermentação fraca de lactose.

3. Enterobacter aerogenes: as colônias e o crescimento confluente aparecem de rosa brilhante a vermelho, mas não são circundados por um precipitado rosa (turvação) no ágar ao redor do crescimento (ver Fig. 15). Fermentação fraca de lactose.

4. Enterobacter cloacae : as colônias e o crescimento confluente aparecem de rosa brilhante a vermelho, mas não são circundados por um precipitado rosa (turvação) no ágar ao redor do crescimento (ver Fig. 16). Fermentação fraca de lactose.

5. Proteus mirabilis: ágar de colônias incolores relativamente transparente (ver Fig. 17). Sem fermentação de lactose.

6 . Proteus vulgaris: ágar de colônias incolores relativamente transparente (ver Fig. 18). Sem fermentação de lactose.

7 . Serratia marcescens : ágar de colônias incolores relativamente transparente (ver Fig. 19). Sem fermentação de lactose.

8 . Pseudomonas aeruginosa: ágar de colônias incolores relativamente transparente (ver Fig. 20).

9. Salmonella enterica: ágar de colônias incolores relativamente transparente (ver Fig. 21). Sem fermentação de lactose.

2 . Ágar XLD

Agar xilose lisina desoxicolato (XLD) é usado para isolar e diferenciar bactérias entéricas Gram-negativas, especialmente patógenos intestinais, como Salmonella e Shigella. O ágar XLD contém desoxicolato de sódio, que inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas mas permite o crescimento de Gram-negativos. Ele também contém os açúcares lactose e sacarose, o aminoácido L-lisina, tiossulfato de sódio e o indicador de pH vermelho de fenol. Os resultados podem ser interpretados da seguinte forma:

  • Se a bactéria Gram-negativa fermenta lactose e / ou sacarose, produtos finais ácidos serão produzidos e fazer com que as colônias e o vermelho de fenol no ágar ao redor das colônias ficar amarelo(veja a Fig. 16).
  • Se a lactose e a sacarose não forem fermentadas pela bactéria, mas a aminoácido lisina é descarboxilada, amônia, um produto final alcalino fará com que o vermelho de fenol no ágar em torno das colônias virar um vermelho mais profundo(veja a Fig. 17).
  • Às vezes a bactéria fermenta os açúcares produção de produtos finais ácidos e quebra a lisina produção de produtos finais alcalinos. Nesse caso algumas das colônias e parte do ágar ficam amarelas e algumas das colônias e parte do ágar ficam vermelhas mais profundas(veja a Fig. 18).
  • Se sulfato de hidrogênio é produzido pela bactéria como resultado da redução do tiossulfato, parte ou todo o colônia aparecerá preta(veja a Fig. 19). Normalmente, são necessárias colônias bem isoladas para bons resultados.

A morfologia típica da colônia em ágar XLD é a seguinte:

1. Escherichia coli: colônias planas amarelas algumas cepas podem ser inibidas.

2. Enterobacter e Klebsiella: colônias amarelas mucóides.

3. Proteus: colônias vermelhas a amarelas podem ter centros pretos.

4. Salmonella: geralmente colônias vermelhas com centros pretos.

5. Shigella, Serratia, e Pseudomonas: colônias vermelhas sem centros pretos

Lembre-se, entretanto, de que algumas espécies e subespécies não apresentam reações típicas.

3. Ágar Cetrimida (Pseudomonas Agar P)

Ágar cetrimida contém o químico cetrimida (brometo de cetil timetilamônio) para o inibição seletiva da maioria das bactérias, exceto Pseudomonas. O meio também estimula Pseudomonas aeruginosa para produzir uma série de quelantes de ferro solúveis em água, incluindo pyoverdin e piocianina. A cor verde solúvel em água característica de Pseudomonas aeruginosa é criado quando o pyoverdin fluorescente amarelo-verde ou amarelo-marrom combina com a piocianina solúvel em água azul (veja a Fig. 20). o pyoverdin fluorescente normalmente fluorescem quando a placa é colocada sob uma luz ultravioleta de comprimento de onda curto (veja a Fig. 21). Após alguns minutos em temperatura ambiente, a placa perde a fluorescência. A fluorescência, no entanto, pode ser restaurada colocando a placa de volta a 37 ° C por vários minutos.

4. Teste de oxidase

Neste laboratório, um disco de Taxo N & reg é usado para realizar o teste de oxidase. O teste da oxidase é baseado na produção bacteriana de uma enzima oxidase. Citocromo oxidase, na presença de oxigênio, oxida o reagente de teste para-amino dimetheilanalina oxidase em um disco Taxo-N & reg.

  • No teste imediato, as reações positivas para oxidase irão se tornar um cor rosa em 30 segundos(veja a Fig. 5). Negativo para oxidase não ficará rosa (ver Fig. 6). Essa reação dura apenas alguns minutos.
  • No teste atrasado, colônias oxidase-positivas dentro de 10 mm do disco Taxo-N & reg irão ficará preto em 20 minutos e permanecerá preto(veja a Fig. 7). Se a bactéria for negativa para oxidase, o crescimento ao redor do disco não ficará preto (ver Fig. 8).

Pseudomonas aeruginosa e a maioria dos outros bacilos Gram-negativos não fermentativos são positivos para oxidase com exceção do gênero Plesiomonas, a Enterobacteriaceae são negativos para oxidase.

5. Produção de pigmento em Pseudomonas aeruginosa

A cor verde solúvel em água característica de Pseudomonas aeruginosa é criado quando o pyoverdin fluorescente amarelo-verde ou amarelo-marrom combina com a piocianina solúvel em água azul (veja a Fig. 20). o pyoverdin fluorescente normalmente fluorescem quando a placa é colocada sob uma luz ultravioleta de comprimento de onda curto (ver Fig. 21). Após alguns minutos em temperatura ambiente, a placa perde a fluorescência. A fluorescência, no entanto, pode ser restaurada colocando a placa de volta a 37 ° C por vários minutos. Nenhum dos Enterobacteriaceae produz pigmento a 37 & degC.

6. Odor

A maioria dos Enterobacteriaceae tem um cheiro bastante ruim Pseudomonas aeruginosa produz um aroma característico de fruta ou suco de uva devido à produção de um composto aromático denominado aminoacetofenona.

7. o EnteroPluri-Teste

Uma série de técnicas podem ser usadas para a identificação de espécies e subespécies específicas de Enterobacteriaceae. A especiação é importante porque fornece dados sobre os padrões de suscetibilidade aos agentes antimicrobianos e as mudanças que ocorrem ao longo de um período de tempo. Também é essencial para estudos epidemiológicos, como a determinação de infecções nosocomiais e sua disseminação.

Em um esforço para simplificar a especiação do Enterobacteriaceae e reduzir a quantidade de mídia preparada e espaço de incubação necessários para o laboratório clínico, uma série de sistemas multi-teste foram comercializados. Alguns desses sistemas de teste múltiplo foram combinados com um manual preparado por computador para fornecer identificação com base na probabilidade de ocorrência para cada uma das reações bioquímicas. Desta forma, um grande número de testes bioquímicos pode ser realizado de forma econômica em um curto período de tempo, e os resultados podem ser interpretados com precisão com relativa facilidade e segurança.

o EnteroPluri-Teste (ver Fig. 22) é um tubo de plástico autocontido e compartimentado contendo 12 ágares diferentes (permitindo a realização de um total de 15 testes bioquímicos padrão) e um fio de inoculação fechado. Após a inoculação e incubação, a combinação de reações resultante, juntamente com um Sistema de Identificação e Codificação por Computador (CCIS), permite uma fácil identificação. As várias reações bioquímicas do EnteroPluri-Teste e sua interpretação correta são discutidas abaixo. Embora seja projetado para identificar membros da família bacteriana Enterobacteriaceae, às vezes também identifica biótipos comuns de Pseudomonas e outros bacilos Gram-negativos não fermentativos. Não identifica Pseudomonas aeruginosa.

IDENTIFICANDO MEMBROS DO ENTEROBACTERIACEAE COM O ENTEROPLURI-TESTE

The EnteroPluri-Teste contém 12 ágares diferentes que podem ser usados ​​para realizar 15 testes bioquímicos padrão (ver Fig. 22). Interprete os resultados do seu EnteroPluri-Teste usando as instruções abaixo e registre-as no EnteroPluri-Teste tabela em sua página de resultados. Para obter mais detalhes sobre os 15 testes bioquímicos no EnteroPluri-Teste, consulte a Tabela 13A.

1. Interprete os resultados de glicose fermentação em compartimento 1.

  • Qualquer amarelo = + vermelho = -
  • Se positivo, circule o número 4 abaixo de glicose na página de Resultados.

2. Interprete os resultados de gás produção também em compartimento 1.

  • Cera branca retirada do ágar amarelo = + cera não retirada do ágar = -
  • Se positivo, circule o número 2 abaixo do gás na página de resultados.

3. Interprete os resultados de lisina descarboxilase em compartimento 2.

  • Qualquer violeta = + amarelo = -
  • Se positivo, circule o número 1 sob lisina em sua página de Resultados.

4. Interprete os resultados de ornitina descarboxilase em compartimento 3.

  • Qualquer violeta = + amarelo = -
  • Se positivo, circule o número 4 sob ornitina em sua página de Resultados.

5. Interprete os resultados de H2S produção em compartimento 4.

  • Preto / marrom = + bege = - (O preto pode desbotar ou voltar a ser negativo se o EnteroPluri-Teste é lido após 24 horas de incubação.)
  • Se positivo, circule o número 2 sob H2S em sua página de resultados.

6. Indole produção também em compartimento 4. Não interprete o teste de indol neste momento. Adicione o reagente de Kovac somente após todos os outros testes terem sido lidos (ver passo 16 abaixo).

7. Interprete os resultados de adonitol fermentação em compartimento 5.

  • Qualquer amarelo = + vermelho = -
  • Se positivo, circule o número 4 sob adonitol em sua página de resultados.

8 Interprete os resultados de lactose fermentação em compartimento 6.

  • Qualquer amarelo = + vermelho = -
  • Se positivo, circule o número 2 abaixo da lactose na página de Resultados.

9. Interprete os resultados de arabinose fermentação em compartimento 7.

  • Qualquer amarelo = + vermelho = -
  • Se positivo, circule o número 1 sob arabinose na página de resultados.

10. Interprete os resultados de sorbitol fermentação em compartimento 8.

  • Qualquer amarelo = + vermelho = -
  • Se positivo, circule o número 4 sob sorbitol na página de Resultados.

11. Voges-Praskauer (VP) teste em compartimento 9. Não interprete o teste de VP neste momento. Adicione os reagentes alfa-naftol e hidróxido de potássio (KOH) somente após todos os outros testes terem sido lidos (ver passo 17 abaixo).

12. Interprete os resultados de dulcitol fermentação em compartimento 10.

  • Amarelo = + verde ou marrom escuro = -
  • Se positivo, circule o número 1 sob dulcitol na página de Resultados.

13. Interprete os resultados de PA desaminase também em compartimento 10.

  • Castanho escuro = + verde ou amarelo = -
  • Se positivo, circule o número 4 sob PA em sua página de resultados.

14. Interprete os resultados de ureia hidrólise em compartimento 11.

  • Rosa, vermelho ou roxo = + bege = -
  • Se positivo, circule o número 2 abaixo da uréia na página de resultados.

15. Interprete os resultados de citrato utilização em compartimento 12.

  • Qualquer azul = + verde = -
  • Se positivo, circule o número 1 abaixo de citrato na página de resultados.

16. Seu instrutor adicionará 2-3 gotas de Reagente de Kovac para o compartimento de teste indol.

17. Ynosso instrutor irá adicionar 3 gotas de reagente alfa-naftol e 2 gotas de hidróxido de potássio (KOH) para o compartimento de teste VP.

18. Adicione todos os valores de número de teste positivo em cada seção entre colchetes e insira cada soma em sua caixa de código no EnteroPluri-Teste gráfico em sua página de resultados.

19. O número de 5 dígitos é o número do CODICE. Procure esse número no Livro de código e identifique o seu desconhecido. (Caso mais de um organismo seja listado, os testes de confirmação indicados no CCIS normalmente teriam que ser realizados. Além disso, uma identificação de Salmonella ou Shigella normalmente seria confirmado por teste sorológico direto, conforme será descrito no Laboratório 17.)


Introdução à Entomologia Forense

Entomologia é o estudo de insetos e artrópodes relacionados (crustáceos, aranhas, etc). Quando o estudo da entomologia é utilizado para auxiliar nas investigações da morte legal, é denominado Entomologia Forense.

O tipo mais visível de Entomologia Forense é usado na investigação de casos de morte, abuso e negligência. A contribuição mais importante do estudo da entomologia é a estimativa do intervalo de tempo post mortem desde a morte (TSD). Diferentes informações podem ser extraídas do estudo de artrópodes em cadáveres presentes na cena do crime. Os suspeitos podem ser vinculados a uma cena de crime pela presença de artrópodes.

O papel de um entomologista forense em uma investigação de morte pode ser importante. Seu papel é coletar e identificar espécimes de artrópodes e então interpretar as descobertas das variáveis ​​ambientais.

Os entomologistas forenses podem fornecer uma estimativa objetiva do tempo desde a morte (TSD), bem como outras informações valiosas sobre as circunstâncias que cercam o falecimento da vítima, incluindo a estação da morte, local da morte, movimento ou armazenamento de restos mortais após a morte, locais específicos de lesão no corpo, artefatos post mortem no corpo, uso de drogas, podendo até fornecer informações para vincular um suspeito à cena do crime, ao caso de negligência infantil ou abuso sexual, bem como na identificação de suspeitos.

Sabe-se que os califorídeos causam miíase e podem estar envolvidos na transmissão mecânica de doenças. A miíase é geralmente produzida pela deposição de ovos ou larvas pelas moscas fêmeas nos corpos de pessoas ou animais, geralmente em aberturas corporais ou em feridas ou feridas.

Entomologia médico-legal lida com o uso de insetos associados a um cadáver na cena do crime em uma investigação legal para fornecer dados usando os métodos normais da patologia clássica. A determinação do intervalo pós-morte é uma etapa crucial e fundamental em qualquer investigação de óbito quando a morte não foi testemunhada.

A estimativa do intervalo pós-morte (PMI) é definida como o período de tempo entre a morte e a descoberta do cadáver. No início da morte, os parâmetros médicos para estabelecer a causa, a forma e o tempo desde a morte começam a se degradar. Com o passar do tempo e a decomposição do tecido mole, uma determinação post mortem torna-se mais difícil e menos precisa.

A Entomologia Forense é agora uma parte integrante de uma investigação de morte enquanto estima o tempo desde a morte (TSD) além de 72 horas. A entomologia forense é considerada o método mais preciso para estimar o tempo decorrido desde a morte, particularmente quando mais de 3 dias se passaram. A Entomologia Forense foi utilizada com sucesso no mais famoso Caso Buck Ruxton em 1935 no Reino Unido.

Desde então, a importância da Entomologia Forense aumentou dramaticamente. O crédito para o primeiro caso de entomologia vai para o Médico francês Bergeret, que aplica o estudo da Entomologia Forense na estimativa do tempo desde a morte em 1855. Provavelmente o melhor estudo sobre insetos (Entomologia) e suas relações com as taxas de decomposição foram relatadas em 1958 por Reed.

O uso de Forense Entomologia para investigar casos de mortes ilícitas aumentou dramaticamente nos últimos anos. As moscas estão entre os primeiros insetos a descobrir e colonizar restos humanos. As larvas de varejeira também são amplamente utilizadas em entomologia forense, principalmente para estabelecer o tempo mínimo decorrido desde a morte.

Em investigações de morte médico-legais, uma das questões mais críticas é: "Quando a morte ocorreu?" Uma estimativa precisa do intervalo post mortem tem relevância especial em um caso de homicídio porque essa informação pode estreitar o campo de possíveis suspeitos de um crime.

A aplicação da Entomologia requer amplo conhecimento dos fatores que interferem nos processos de colonização, no tempo de desenvolvimento e na decomposição dos cadáveres por insetos. O conhecimento da distribuição, biologia, ecologia e comportamento dos insetos encontrados na cena do crime pode fornecer informações sobre quando, onde e como o crime foi cometido.

Coleta e preservação de evidências

Para aproveitar o valor potencial forense dos artrópodes, as evidências devem ser sistematicamente coletadas e preservadas. Em 1983, foi publicado o primeiro artigo sobre coleta adequada e preservação de importantes evidências forenses. Uma compreensão básica da biologia e anatomia dos insetos, especialmente no que diz respeito a moscas e besouros, deve facilitar a pesquisa, o reconhecimento e a coleta de espécimes de insetos para fins de prova.

Os ovos ou larvas coletados devem ser colocados diretamente em uma solução conservante. O fluido conservante sugerido é KAA (95% de etanol 80-100 ml, 20 ml de ácido acético glacial e 10 ml de querosene), mas existem vários métodos diferentes. Uma excelente técnica de preservação é escaldar as larvas em água quente (quase fervente) por 60 a 120 segundos e, em seguida, colocar as larvas escaldadas em álcool etílico a 80%. É importante entender que, com larvas de insetos de corpo mole, a simples colocação do inseto diretamente em álcool etílico a 80% não é um método adequado de preservação.

A Entomologia Forense é reconhecida em muitos países como uma ferramenta importante nas investigações jurídicas. Com o avanço da Entomologia Forense, os investigadores também consideraram os efeitos dos fatores complicadores que foram discutidos neste artigo. Vários métodos para estimar o intervalo pós-morte de moscas (Diptera: Calliphoridae) e os problemas associados a ele foram analisados ​​no estudo.


Você consegue diferenciar uma marta de um pescador? Os desafios da identificação da vida selvagem por crowdsourcing em Michigan

Crédito: Universidade de Michigan

A maioria das pessoas consegue identificar corretamente as fotografias de animais comuns, como veados, guaxinins, gambás e esquilos.

Mas você consegue distinguir um lobo cinzento de um coiote ou identificar corretamente os membros da família dos mustelídeos, que inclui a marta americana, a doninha de cauda longa, o pescador e o vison?

Quase 4.000 cientistas cidadãos, incluindo muitos estudantes K-12, participaram de um estudo recente da Universidade de Michigan que usou centenas de câmeras da vida selvagem acionadas por movimento nas florestas de Michigan para estudar os mamíferos do estado, com ênfase na ecologia da comunidade entre os carnívoros.

As câmeras digitais capturaram mais de 10.000 sequências de imagens e os voluntários foram solicitados a identificar as criaturas. Crowdsourcing de identificações de vida selvagem a partir de pesquisas de câmera tornou-se cada vez mais comum nos últimos anos, mas alguns pesquisadores levantaram preocupações sobre a precisão e usabilidade de dados gerados pelo público.

Os cientistas da U-M afirmam que suas descobertas reafirmam que - quando os estudos são planejados de maneira adequada - a identificação coletiva da vida selvagem é uma maneira confiável de aliviar a carga de trabalho de uma equipe de pesquisa e, ao mesmo tempo, aumentar a participação do público na ciência.

No estudo, a precisão geral das identificações dos voluntários foi de 97%.

Um vison no Shiawassee National Wildlife Refuge no Condado de Saginaw, na Península Inferior de Michigan. Os visons são membros da família mustelídeo dos carnívoros com peles. No estudo da vida selvagem da Universidade de Michigan, os voluntários tiveram dificuldade em distinguir vários mustelídeos, que também incluem o pescador, a marta americana e as doninhas. Crédito: Laboratório de Ecologia Aplicada à Vida Selvagem da Universidade de Michigan

No entanto, os não especialistas tiveram alguma dificuldade em distinguir animais de aparência semelhante, como os coiotes e lobos cinzentos que coexistem na Península Superior, bem como criaturas raras ou raramente encontradas pelo público em geral, como os mustelídeos.

"Desenvolvemos protocolos robustos que levam em consideração os vários graus de conhecimento dos participantes sobre a vida selvagem, e esses métodos nos ajudaram a garantir a confiabilidade dos dados", disse Gabriel Gadsden, primeiro autor do estudo publicado online em 24 de maio na revista especializada Wildlife Society Bulletin .

"Nossa esperança é que outros cientistas que talvez estejam relutantes em usar a ciência participativa por causa de preocupações com a qualidade dos dados leiam este artigo e sejam compelidos a incorporar alguns de nossos métodos em seus estudos", disse Gadsden, que era um técnico de pesquisa na UM ' s Laboratório de Ecologia Aplicada à Vida Selvagem quando o trabalho de campo foi concluído. Recentemente, ele fez mestrado na Escola de Meio Ambiente e Sustentabilidade da U-M.

O estudo da vida selvagem foi conduzido em três locais de Michigan, dois na Península Inferior (a Estação Biológica da Universidade de Michigan em Pellston e o Refúgio Nacional de Vida Selvagem Shiawassee em Saginaw County) e um na Península Superior (o Huron Mountain Club).

Os pesquisadores implantaram 273 câmeras nas três áreas de estudo e desenvolveram um site de ciência pública chamado Michigan ZoomIN na plataforma de crowdsourcing Zooniverse Project Builder para ajudar na identificação de 10.199 sequências de imagens. Zooniverse já hospedou mais de 200 projetos de várias disciplinas científicas, incluindo astronomia, ecologia, física e história.

"Os estudos de armadilhas fotográficas geram grandes quantidades de dados que podem ser um fator limitante no monitoramento biológico e na investigação ecológica. Portanto, envolver o público em nosso estudo se mostrou extremamente útil, dada a alta precisão da identificação de espécies", disse o ecologista da vida selvagem da UM. Nyeema Harris, autora sênior do estudo e diretora do Applied Wildlife Ecology Lab.

Uma gambá iluminada pelo flash da câmera em uma fotografia noturna no Shiawassee National Wildlife Refuge, no Condado de Saginaw. Pesquisadores da Universidade de Michigan implantaram 273 câmeras acionadas por movimento em três áreas de estudo de Michigan para fotografar os mamíferos do estado, com foco especial nos carnívoros e suas presas. Crédito: Laboratório de Ecologia Aplicada à Vida Selvagem da Universidade de Michigan

"Mas esta pesquisa nunca foi apenas para validar a ciência participativa ou coletar dados ecológicos. Michigan ZoomIN também é uma ferramenta educacional para construir a alfabetização científica e aumentar o entusiasmo sobre a vida selvagem", disse Harris, professor assistente do Departamento de Ecologia e Biologia Evolutiva.

Os parceiros no projeto incluíram o programa educacional Wolverine Express da U-M, a Sociedade Zoológica de Detroit, o Museu de História Natural da U-M, a Biblioteca do distrito de Ann Arbor, a Biblioteca Shapiro da U-M e o Departamento de Recursos Naturais de Michigan.

Para o estudo, os voluntários receberam fotos de referência e descrições escritas dos animais para ajudar na identificação. Cada sequência de três imagens foi revisada por 15 voluntários. Para avaliar a precisão das identificações de crowdsourcing, os especialistas em vida selvagem revisaram mais de 5.000 fotos.

Dois terços das imagens foram identificados com total concordância entre todos os 15 espectadores não especialistas. Quando a identificação não era unânime, vários métodos estatísticos foram usados ​​para chegar a um consenso sobre a identificação da espécie.

Embora a precisão da identificação geral fosse muito alta, duas famílias de animais - os canídeos e os mustelídeos - mostraram-se desafiadores. Canídeos são carnívoros parecidos com cães que incluem coiotes, lobos, raposas e cães domesticados. Mustelídeos são carnívoros parecidos com doninhas que incluem pescadores, lontras, martas e martas.

O Huron Mountain Club na Península Superior é a mais remota das três áreas de estudo e tem a maior diversidade de espécies de mamíferos, incluindo mustelídeos. Ele também teve a menor porcentagem geral de identificações de espécies corretas e unânimes no estudo U-M: 62%.

Uma marta americana no Huron Mountain Club na Península Superior de Michigan, fotografada no início da manhã com uma câmera de flash branco. A marta americana é um membro da família mustelida de carnívoros com peles. No estudo da vida selvagem da Universidade de Michigan, os voluntários tiveram dificuldade em distinguir vários mustelídeos, que também incluem pescadores, doninhas e visons. Crédito: Laboratório de Ecologia Aplicada à Vida Selvagem da Universidade de Michigan

No Huron Mountain Club, os coiotes vivem ao lado do lobo cinza maior e da raposa vermelha menor. No estudo da armadilha fotográfica U-M, os coiotes às vezes eram erroneamente identificados como lobos ou raposas, enquanto os lobos cinzentos eram ocasionalmente erroneamente identificados como coiotes.

Mustelids teve a menor precisão de identificação geral de qualquer grupo de animais no estudo. Menos de 1% deles foram identificados corretamente por todos os 15 espectadores não especialistas, e mesmo as identificações de consenso estavam corretas apenas 59% das vezes.

A baixa precisão das identificações de mustelídeos é provavelmente devido ao fato de que a família inclui várias espécies que são difíceis para os não especialistas distinguirem, disse Gadsden.

"Nosso estudo descobriu que as espécies comuns, aquelas com características distintivas e, geralmente, as espécies maiores eram mais facilmente identificáveis ​​pelo público", disse ele.

Os mamíferos identificados por voluntários com 90% ou mais de precisão incluíram guaxinins, veados-de-cauda-branca, gambás listrados, gambás, esquilo cinza oriental, lince e porco-espinho. As espécies identificadas com 80% ou mais de precisão incluíram esquilo, urso preto, coelho coelho e marmota. As espécies identificadas com menos de 79% de precisão incluíram lebre com raquetes de neve, texugo americano, marta, pescador, rato almiscarado, doninhas, lobo cinzento, raposa vermelha, vison, raposa cinza e mamíferos muito pequenos, como o rato veado.

Depois que o trabalho de campo para este estudo foi realizado, de 2015 a 2017, um quarto site Michigan ZoomIN foi adicionado em Detroit.


Ordem dos insetos, Trichoptera (Caddisflies)

Alguns dizem que caddisflies são ainda mais importantes do que mayflies, e provavelmente estão certos. O mundo da pesca demorou um pouco para aceitar essa blasfêmia. As imitações dos caddis estão perto de receber sua cota de tarifa no final do tippet, mas muitos pescadores ainda presumem que todos os caddisflies são praticamente iguais.

As espécies de Caddis, na verdade, fornecem tanto incentivo para aprender suas especificidades quanto as efemérides. Há tanta variedade em seus comportamentos de emergência e postura de ovos, e tantos padrões e técnicas são necessários para combiná-los. Os pescadores são prejudicados apenas pela relativa falta de informação sobre o comportamento e identificação do caddisfly.

Em muitas espécies, as pupas tornam-se muito ativas pouco antes da emergência e vagam ao longo do fundo do rio, às vezes por horas. Os padrões de "pupa de brilho profundo" introduzidos por Gary LaFontaine em Caddisflies são os mais populares de muitas imitações inspiradas por esse comportamento. É o sonho de um pescador de ninfa profunda. Às vezes, eles flutuam de forma semelhante logo abaixo da superfície por um longo tempo antes de tentarem romper.


    A maioria das espécies sobe à superfície e luta. Eles geralmente voam rapidamente uma vez que estão fora da água, mas as espécies lentas primeiro lutam e vagueiam por longas distâncias semi-submersas enquanto se contorcem para se livrar de suas cascas pupais (

Depois de emergir, os adultos caddisfly vivem por muito tempo em comparação com as efemérides, em parte porque são capazes de beber para evitar a desidratação (as efeminadas adultas não podem comer nem beber). Este período de voo ( Período de vôo: O período de tempo que os adultos de uma espécie de inseto aquático adulto ficam ativos e voando, entre a emergência e a morte. Pode se referir à média de vida adulta dos indivíduos dessa espécie, ou ao período total de tempo durante o qual pelo menos alguns deles estão ativos. ) dura de alguns dias a alguns meses, dependendo da espécie, portanto, os adultos em acasalamento podem ser vistos na água ou sobre a água muito depois que a emergência estiver completa.

Muitas fêmeas caddisfly mergulham debaixo d'água para colocar seus ovos no fundo do riacho. Alguns rastejam objetos para fazer isso, mas a maioria nadam direto para baixo através da coluna de água. Estes últimos são responsáveis ​​pela minha ação de pesca de trutas mais rápida de todos os tempos - dias em que as trutas competiam entre si para atacar minhas moscas no momento em que atingiam a água, lançada após lançada.

Outros colocam seus ovos na superfície de várias maneiras. Eles podem voar baixo sobre a água, mergulhando periodicamente seus abdomens para colocar ovos. Outros pousam na superfície repetidamente, agitando-se e vibrando em comoção sedutora. Espécies menos ativas podem cair gastas ( Gasto: A posição das asas de muitos insetos aquáticos quando caem na água após o acasalamento. As asas de ambos os lados estavam planas na água. A palavra pode ser usada para descrever insetos com suas asas naquela posição, bem como a própria posição. ) à superfície com as quatro asas abertas. Outros navegam serenamente na água enquanto colocam seus ovos, e eles são os mais fáceis de combinar com a deriva morta ( Dead-drift: Maneira como uma mosca flutua na água quando não se move sozinha ou por influência de uma linha. As trutas geralmente preferem presas à deriva morta e imitar a deriva morta em correntes traiçoeiras é um grande desafio da pesca com mosca. ) técnicas de pescadores de mayfly.

Alguns métodos de postura de ovos mantêm as fêmeas adultas totalmente protegidas das trutas. Eles podem colocar seus ovos na água de plantas pendentes ou colocar seus ovos na própria vegetação. Dessa forma, os ovos não entram no rio até a próxima chuva - uma excelente estratégia de sobrevivência à seca.

A maioria das larvas de caddisfly vive em casos que constroem de areia, pedra, galhos, pedaços de folhas e qualquer outro tipo de detrito subaquático. Alguns até geram suas próprias caixas de seda. Há uma enorme variação no estilo da caixa e também na maneira como as larvas administram seus casos: se eles o substituem à medida que crescem ou renovam o antigo, e se o carregam ou fixam em um objeto. As trutas adoram comer essas larvas, caso e tudo.

Outras larvas de caddis comuns constroem redes em vez de caixas. Não são residências, mas armadilhas de caça, como minúsculas teias de aranha, projetadas para capturar o plâncton e os insetos aquáticos menores que as larvas comem. Uma larva pode construir mais de uma rede e vagar livremente ao redor das rochas e troncos, cuidando de cada uma e ingerindo a captura. As famílias giratórias, em ordem de abundância, são Hydropsychidae, Philopotamidae e Arctopsychidae.

Uma grande e primitiva família de caddisflies, Rhyacophilidae, não precisa de estojos nem redes. A maioria de suas espécies são predadores que espreitam por corredeiras rochosas matando outras larvas de insetos e ninfas.

Todos esses tipos são especialmente propensos a desvios comportamentais ( Deriva comportamental: As ninfas e larvas de muitos insetos aquáticos às vezes soltam seu controle no fundo e flutuam rio abaixo por um tempo em um tempo sincronizado. Este fenômeno aumenta sua vulnerabilidade às trutas assim como a emergência, mas é invisível para o pescador acima da superfície. Em muitas espécies, ocorre diariamente, na maioria das vezes logo após o anoitecer ou antes do amanhecer. ), tornando-os uma importante fonte de alimento durante todo o ano para as trutas na maioria dos rios.

Quando as larvas dos caddis crescem, procuram esconderijos para se transformarem em pupas, seja em seus estojos ou em casulos especiais. Eles são considerados pupas em toda a reforma radical de larva semelhante a uma larva em intrincado adulto alado. Parte da massa corporal da larva é consumida como energia para o desenvolvimento da pupa, de modo que as pupas e os adultos têm corpos de um a três tamanhos de gancho menores do que suas larvas maduras. Quando a pupação está completa, o inseto que inicia a sequência de emergência é chamado de adulto farato ( Farata adulto: Os cadáveres são considerados pupas durante a sua transformação de larva em adulto. Essa transformação é concluída antes que eles estejam prontos para emergir. O inseto emergente que imitamos com os padrões de "pupa" que amarramos é tecnicamente chamado de adulto farato. É um caddisfly adulto totalmente formado com uma camada extra de exoesqueleto em torno dele e restringindo suas asas. ) Não é mais tecnicamente uma pupa na linguagem dos entomologistas, mas como os pescadores reconhecem universalmente o termo "pupa", uso esse termo convencional em todo este site.

Às vezes, indivíduos dentro da mesma espécie emergente no outono amadurecem em taxas diferentes. Em algumas espécies, as larvas maduras compensam isso entrando em uma fase inativa chamada diapausa ( Diapause: Um estado de dormência completa mais profundo até do que a hibernação. Durante a diapausa, um organismo não se move, não come ou mesmo cresce. Algumas larvas caddisfly entram em diapausa por algumas semanas a vários meses. Algumas espécies de zooplâncton microscópico podem entrar em diapausa por várias centenas de anos. ) antes da pupação. O clima frio de outono desencadeia o fim dessa fase para cada indivíduo em poucas semanas, sincronizando emergências que, de outra forma, se espalhariam por vários meses. Isso aumenta a qualidade das incubações de caddisfly de outono, como o gênero ocidental gigante Dicosmoecus.

A presença de caddisfly adultos no ar não significa que o pescador deva passar imediatamente para uma imitação. Como Swisher e Richards colocaram em Selective Trout:


Funil Web Spiders


Freqüentemente chamadas de aranhas de grama, as aranhas de teia de funil (Agelenidae) também ocasionalmente entram em casas durante o tempo frio. Olhar para sua extremidade final representa uma regra geral de identificação da web de funil. Muitas espécies têm fieiras estendidas e isso as diferencia das aranhas-lobo.

Uma foto em close dos olhos também ajuda na identificação. Os olhos da aranha teia em funil são dispostos em duas fileiras estreitas e relativamente retas. O arranjo dos olhos lhes dá uma aparência voltada para o futuro.

A maioria das aranhas de teia de funil não é considerada perigosa para os humanos. O Hobo Spider no noroeste do Pacífico seria a exceção.


Mansonelose

Três espécies de Mansonella, um gênero de nematóide filarial transmitido por vetor, estão associados a infecções humanas: M. ozzardi, e M. perstans (=Dipetalonema perstans), e M. streptocerca (= Dipetalonema streptocerca). Essas espécies variam em sua ocorrência geográfica e localização dentro do hospedeiro. Recentemente, um novo clado molecular de M. perstans, M. perstans & ldquodeux & rdquo foi relatado no Brasil e no Gabão. Em raras ocasiões, espécies zoonóticas como M. rodhaini e outro não identificado Mansonella sp. foram detectados em infecções humanas.

Ciclos de vida

Mansonella perstans

Durante uma refeição de sangue, um mosquito infectado introduz larvas de terceiro estágio (L3) na pele do hospedeiro humano, onde penetram na ferida da picada . Eles se desenvolvem em adultos que residem nas cavidades corporais, mais comumente na cavidade peritoneal ou cavidade pleural, e menos frequentemente no pericárdio . A faixa de tamanho para vermes fêmeas é de 70 a 80 mm de comprimento e 120 & microm de diâmetro, e os machos medem aproximadamente 45 mm por 60 & microm. Os adultos produzem microfilárias subperiódicas sem bainha (200 e microm de comprimento, 4,5 e microm de largura) que entram na circulação periférica . Um vetor midge ingere microfilárias durante uma refeição de sangue . Após a ingestão, as microfilárias migram do intestino médio do mosquito e rsquos através da hemocele para os músculos torácicos do artrópode . Lá, as microfilárias se desenvolvem em larvas de primeiro estágio e, posteriormente, em larvas infectantes de terceiro estágio . As larvas infecciosas de terceiro estágio migram para a tromba midge & rsquos e pode infectar outro humano quando o mosquito se alimenta de sangue .

Mansonella ozzardi

Durante uma refeição de sangue, um artrópode infectado (mosquitos, gênero Culicoides, ou moscas pretas, gênero Simulium) introduz larvas filariais de terceiro estágio na pele do hospedeiro humano, onde penetram na ferida da mordida . Eles se desenvolvem em adultos que geralmente residem nos tecidos subcutâneos . Os vermes adultos são pequenos e delgados, medindo cerca de 49 mm de comprimento e 150 mm de largura (fêmeas) ou 26 mm de comprimento e 70 mm de largura (machos). Os adultos produzem microfilárias sem bainha e não periódicas que atingem a corrente sanguínea . O artrópode ingere microfilárias durante uma refeição de sangue . Após a ingestão, as microfilárias migram do intestino médio do artrópode através da hemocele para os músculos torácicos . Lá, as microfilárias se desenvolvem em larvas de primeiro estágio e posteriormente em larvas infectantes de terceiro estágio . As larvas infectantes de terceiro estágio migram para artrópodes e probóscide e pode infectar outro ser humano quando o artrópode se alimenta de sangue .

Mansonella streptocerca

Durante uma refeição de sangue, um mosquito infectado introduz larvas filariais de terceiro estágio na pele do hospedeiro humano, onde penetram na ferida da picada . Eles se desenvolvem em adultos que residem na derme, mais comumente a menos de 1 mm da superfície da pele . As fêmeas medem aproximadamente 27 mm de comprimento e têm 50 µm de largura no nível da vulva (anteriormente) e ovários (perto da extremidade posterior), e até 85 µm no meio do corpo. Os machos medem 50 µm de diâmetro. Os adultos produzem microfilárias sem bainha e não periódicas, medindo 180 a 240 & microm por 3 a 5 & microm, que residem na pele, mas também podem atingir o sangue periférico . O vetor midge ingere as microfilárias durante uma refeição de sangue . Após a ingestão, as microfilárias migram do intestino médio do mosquito e rsquos através da hemocele para os músculos torácicos . Lá, as microfilárias se desenvolvem em larvas de primeiro estágio e posteriormente em larvas de terceiro estágio . As larvas de terceiro estágio migram para a tromba midge & rsquos e pode infectar outro humano quando o mosquito faz outra refeição de sangue .

Hosts e vetores

M. perstans parece ser apenas uma espécie associada ao homem. Os vetores primários são mosquitos picadores do gênero Culicoides.

M. ozzardi também parece estar associado principalmente a humanos, mas macacos patas (Erythrocebus patas) foram infectados experimentalmente. Os vetores primários são mosquitos picadores do gênero Culicoides. Em algumas áreas da América do Sul, a mosca negra Simulium amazonicum e no Haiti, o midge Leptoconops bequaerti podem atuar como vetores concorrentes.

M. streptocerca é principalmente um parasita de humanos, mas infecções em chimpanzés selvagens foram relatadas em raras ocasiões. Como outro Mansonella spp., os vetores primários são mosquitos picadores do gênero Culicoides.

Distribuição geográfica

Mansonella perstans é endêmico em toda a África Ocidental, Oriental e Central, e também é altamente prevalente em algumas regiões neotropicais da América Central e do Sul, onde provavelmente foi introduzido.

M. ozzardi é uma espécie do Novo Mundo com distribuição irregular, encontrada na América Central, América do Sul (Argentina, Bolívia, Brasil, Colômbia, Guiana, Suriname e Venezuela) e várias ilhas do Caribe.

M. streptocerca é uma espécie do Velho Mundo que ocorre nas regiões tropicais da África Ocidental e Central.

Geralmente, a transmissão de Mansonella spp. é altamente focal e a prevalência local varia amplamente dentro das regiões endêmicas. Casos relacionados a viagens em residentes de países não endêmicos são incomuns, mas foram documentados.

Apresentação clínica

Em contraste com outras doenças filariais (filariose bancroftiana, oncocercose e loíase) que mais comumente causam doença em pessoas infectadas, a apresentação clínica da maioria Mansonella as infecções geralmente parecem ser leves; muitas infecções são assintomáticas, principalmente entre os indivíduos que vivem em regiões endêmicas. Uma característica complicadora de Mansonella infecções é que sua distribuição geográfica se sobrepõe a outras doenças filariais que podem ter manifestações clínicas semelhantes. É difícil ter certeza de que os sintomas identificados em estudos transversais de pacientes em áreas endêmicas foram devido a Mansonella ou à coinfecção com outros parasitas.

A maioria das infecções com M. perstans são considerados assintomáticos. Quando os sintomas ocorrem, eles aparecem relacionados à migração de vermes adultos e incluem inchaços subcutâneos transitórios (semelhantes aos causados ​​por Loa loa), pericardite e pleurite e sintomas oculares (por exemplo, acuidade visual prejudicada) se as microfilárias entrarem no olho. Podem ocorrer sintomas inespecíficos, incluindo febre, fadiga, prurido, artralgias e dor abdominal. Também foram relatados cefaleia e sintomas neuropsiquiátricos. Os sinais podem incluir linfadenopatia e eosinofilia.

No M. ozzardi, a maioria das infecções é assintomática, embora febre, prurido, artralgias, cefaleia, erupções cutâneas, linfadenopatia, edema e sintomas pulmonares sejam relatados e a eosinofilia seja comum. No Brasil, algumas infecções têm sido associadas a lesões na córnea.

Menos se sabe sobre as manifestações clínicas de M. streptocerca no entanto, acredita-se que a maioria das infecções seja assintomática. Prurido, dermatite e lesões hiperpigmentadas no tronco são relatados em associação com M. streptocerca, no entanto, não ocorrem nódulos subcutâneos. Como em infecções com outros Mansonella spp., a eosinofilia é comum.

Microfilariae de Mansonella perstans estão sem bainha e medem 190 & mdash200 & microm em esfregaços de sangue corados e 180 & mdash225 & microm em formalina a 2%. A cauda é romba e os núcleos se estendem até a ponta da cauda. As microfilárias circulam no sangue.

Microfilariae de Mansonella ozzardi estão sem bainha e medem 160 & mdash205 & microm em esfregaços de sangue corados e 200 & mdash255 & microm em formalina a 2%. A cauda afunila em uma ponta e os núcleos terminam bem antes do final da cauda, ​​que geralmente é dobrada em uma pequena forma de gancho. As microfilárias circulam no sangue, mas podem ser raramente encontradas na pele e, portanto, devem ser diferenciadas de Wuchereria bancrofti e Onchocerca volvulus.

Microfilariae de Mansonella streptocerca estão sem bainha e medem 180 & mdash240 & microm por 3 & mdash5 & microm. A cauda é dobrada em forma de gancho e os núcleos se estendem até o final da cauda. As microfilárias são encontradas na pele e não circulam no sangue, devendo ser distinguidas das de Onchocerca volvulus.

Raramente, Mansonella streptocerca podem ser encontrados em seções de tecido. Os adultos são muito pequenos (diâmetro máximo de 80 µm para mulheres, 50 µm para homens) e têm características filariais típicas, incluindo tubos uterinos emparelhados e intestino diminuído. A musculatura é celomiana com uma porção alta e contrátil. As microfilárias podem ser vistas em vários estágios de desenvolvimento em útero.

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1,5 mm abaixo da superfície da pele, corado com hematoxilina e eosina.

Diagnóstico Laboratorial

Microscopia

Mansonella perstans e M. ozzardi são geralmente diagnosticados pela descoberta de microfilárias circulando no sangue, enquanto M. streptocerca geralmente é diagnosticado pela descoberta de microfilárias em recortes de pele. Os raros casos humanos de M. rodhaini também foram diagnosticados por meio de recortes de pele. As técnicas de concentração (por exemplo, concentração de Knott & rsquos, filtração por membrana de policarbonato) podem aumentar a sensibilidade. Observe que essas filarias geralmente não exibem periodicidade, embora em algumas regiões, M. perstansos pacientes infectados podem apresentar microfilaremia ligeiramente elevada nas primeiras horas da manhã.

Cortes de pele devem ser grossos o suficiente para incluir a parte externa das papilas dérmicas, mas não tão grossos a ponto de produzir sangramento (a

Uma seção de 2 mm de largura deve ser suficiente). Cortes de pele devem ser colocados imediatamente em solução salina normal ou água destilada, apenas o suficiente para cobrir a amostra. As microfilárias tendem a emergir mais rapidamente em solução salina, no entanto, em qualquer meio, as microfilárias normalmente emergem em 30 & mdash60 min e podem ser vistas em preparações de montagem úmida. Para um diagnóstico definitivo, deixe a montagem úmida secar, fixe em metanol e core com Giemsa ou hematoxilina e eosina.

Detecção Molecular

No contexto do diagnóstico clínico, o uso principal de Mansonella o teste molecular é para auxiliar na diferenciação de microfilárias de M. streptocerca a partir de Onchocerca volvulus em recortes de pele. Em ambientes de pesquisa, os ensaios de PCR em tempo real (RT-PCR) podem ser usados ​​para detectar e quantificar M. perstans e M. ozzardi microfilárias e ensaios de amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) foram desenvolvidos para uso em campo.

Teste Sorológico

Ensaios sorológicos desenvolvidos para a detecção de Mansonella spp.& ndashanticorpos ou antígenos específicos são geralmente de utilidade limitada devido a reações cruzadas com outras espécies filariais e potencialmente outros nematóides.

Segurança de Laboratório

Aplicam-se as precauções padrão para o processamento de amostras de sangue e tecido.


Resumo

Os pássaros são os últimos dinossauros sobreviventes. Os pássaros têm muitas características que são únicas entre os vertebrados vivos e são adaptados de forma única para voar. No entanto, a maioria das características únicas dos pássaros não evoluiu originalmente como adaptações para o vôo. Em vez disso, essas características evoluíram nos ancestrais dinossauros dos pássaros, muito antes da evolução do vôo nos pássaros. A forma e a função dos esqueletos de pássaros refletem tanto a ancestralidade dos pássaros como dinossauros quanto as demandas evolutivas do vôo.

Algumas características importantes que são compartilhadas por pássaros e dinossauros extintos:

  • Furcula. Embora os dinossauros não voadores tivessem uma fúrcula, ela não tinha a construção elástica encontrada em pássaros vivos.
  • Ossos pneumáticos. Ossos cheios de ar podem ser rígidos e leves para voar, mas originalmente evoluíram em dinossauros que não voavam. Pelo que eu sei, não está claro por que os espaços aéreos desses ossos devem ser conectados aos sacos aéreos respiratórios.
  • Penas. Os pássaros são os únicos animais vivos com penas, e as penas são essenciais para a mecânica de seu voo. No entanto, muitos dinossauros não voadores também tinham penas.

O que é uma adaptação?

Campbell define uma adaptação como "uma característica herdada de um organismo que aumenta sua sobrevivência e reprodução em um ambiente específico." Segundo essa definição, as estruturas das aves, como a fúcula, os ossos pneumáticos e as penas, são adaptações importantes para os animais voadores. Por outro lado, essas estruturas não surgiram originalmente como adaptações para o voo, mas os dinossauros já possuíam um conjunto de caracteres que os tornava adequados para o voo, muito antes da origem dos pássaros.


Outros Contatos

Para perguntas sobre insetos e pragas relacionadas nas plantas ou dentro e ao redor da casa:você pode entrar em contato com o escritório de Extensão Cooperativa local. No estado de Nova York, consulte: Escritórios de extensão cooperativa local

Perguntas sobre o vírus do Nilo Ocidental ou a doença de Lyme: entre em contato com o escritório local do departamento de saúde do seu estado.

Testando carrapatos para doenças: o Cornell Animal Health Diagnostic Center (AHDC) em Ithaca NY pode identificar o carrapato e testar se ele é portador de certos organismos causadores de doenças. Os carrapatos podem ser de um ser humano ou de qualquer animal. Para obter instruções e taxas, consulte:
http://ahdc.vet.cornell.edu/sects/Paras/tickID.cfm Centro de diagnóstico de saúde animal: (607) 253-3900 Email: [email protected]

Para doenças de plantas:entre em contato com a Clínica de Diagnóstico de Doenças de Plantas de Cornell em http://plantclinic.cornell.edu/

Fotos no banner IDL (no topo da página e nas fichas técnicas) © 2012: Da esquerda para a direita: Besouro da pulga do amieiro - adultos (Chrysomelidae: Altica ambiens) Escaravelho - larva (Dermestidae: Dermestes lardarius) Mariposa touceira manchada - lagarta (Erebidae, ou Arctiidae: Lophocampa maculata) Traça da farinha indiana - adulta (Pyralidae: Plodia interpunctella) Formiga milharal (Formicidae: Lasius sp.) com cochonilhas (Coccidae: Coccus sp.) Percevejo europeu, ou piolho-da-mata comum - um isópode, não um inseto (Oniscidae: Oniscus asellus) Besouro-senhora asiático multicolorido - adultos (Coccinellidae: Harmonia axyridis) O Arauto (mariposa) - lagarta (Erebidae ou Noctuidae: Scoliopteryx libatrix).


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